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在藥物開發(fā)領(lǐng)域，靶點膜蛋白制備一直是科研工作者面臨的重大挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)表達(dá)系統(tǒng)難以實現(xiàn)功能性膜蛋白的高效制備，嚴(yán)重制約了藥物開發(fā)進(jìn)程。
近日，珀羅汀生物采用無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)，成功制備出高活性人源SSTR2膜蛋白，經(jīng)表面等離子共振技術(shù)完成精準(zhǔn)親和力檢測，實測其對相應(yīng)抗體展現(xiàn)出超高親和力，KD值達(dá)0.649 nM！
SPR技術(shù)：分子互作檢測的"金標(biāo)準(zhǔn)"
表面等離子共振技術(shù)（SPR）作為無標(biāo)記、實時監(jiān)測生物分子相互作用的權(quán)-威方法，能夠精準(zhǔn)解析結(jié)合參數(shù)（ka、kd及KD值），提供分子互作的全面信息，被業(yè)界認(rèn)為親和力檢測的可靠技術(shù)平臺。
本次實驗以Tidutamab類似物（Human IgG1）作配體，將其捕獲在Protein A芯片，濃度為1 μg/mL。將分析物SSTR2膜蛋白稀釋為5個濃度梯度（12.5 nM ~200 nM），分別進(jìn)行檢測。SSTR2膜蛋白由珀羅汀生物無細(xì)胞蛋白表達(dá)平臺制備，產(chǎn)品名稱：Human SSTR2 Full-Length Protein，產(chǎn)品編號：PLDP0047-1；運行試劑：1*PBS，0.05% DDM，0.01% CHS，pH 7.4。
珀羅汀膜蛋白產(chǎn)品目錄
SSTR2膜蛋白SDS-PAGE
經(jīng)親和力檢測以及動力學(xué)曲線擬合，SSTR2膜蛋白與Tidutamab類似物的親和力常數(shù)為0.649 nM。
無細(xì)胞表達(dá)技術(shù)：膜蛋白研究的利器
無細(xì)胞蛋白表達(dá)（CFPS）是一種體外直接合成蛋白質(zhì)的生物反應(yīng)。珀羅汀無細(xì)胞膜蛋白表達(dá)技術(shù)可控性、開放性高，可以在體系中直接添加去垢劑或納米盤，為膜蛋白提供類膜環(huán)境，從而實現(xiàn)全長膜蛋白可溶性表達(dá)。珀羅汀無細(xì)胞系統(tǒng)在合成膜蛋白時，無需細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時復(fù)雜的靶向、插入、組裝過程，極大提高表達(dá)成功率。
無細(xì)胞+去垢劑表達(dá)體系特點：
規(guī)避毒性問題：無需維持細(xì)胞活力，可大量表達(dá)膜蛋白；
折疊環(huán)境可控：通過優(yōu)化去垢劑類型和濃度，為膜蛋白提供最適折疊環(huán)境。
無細(xì)胞+納米盤表達(dá)優(yōu)勢顯著：
模擬天然環(huán)境：在天然脂質(zhì)雙分子層中完成膜蛋白折疊；
功能更完整：更接近生理狀態(tài)下的構(gòu)象和活性。
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